亲和层析的原理
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- 发布时间：2022-06-28 10:06
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亲和色谱也称为亲和层析，是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和层析在凝胶过滤色谱柱上连接与待分离物质有一定结合能力的分子，它们的结合是可逆的，当流动相条件改变时，它们可以相互分离。亲和层析可用于从混合物中纯化或浓缩分子，或者去除或减少混合物中分子的含量。
亲和层析的原理
亲和色谱也称为亲和层析，是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和层析在凝胶过滤色谱柱上连接与待分离物质有一定结合能力的分子，它们的结合是可逆的，当流动相条件改变时，它们可以相互分离。亲和层析可用于从混合物中纯化或浓缩分子，或者去除或减少混合物中分子的含量。
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亲和色谱也称为亲和层析，是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和层析在凝胶过滤色谱柱上连接与待分离物质有一定结合能力的分子，它们的结合是可逆的，当流动相条件改变时，它们可以相互分离。亲和层析可用于从混合物中纯化或浓缩分子，或者去除或减少混合物中分子的含量。
亲和层析原则
以一对能可逆结合和解离的生物分子中的一个作为配体(也称配体)，与具有大孔径和亲水性的固体载体偶联，制备特异性亲和吸附剂。然后，用亲和吸附剂填充色谱柱。当含有被分离物质的混合物流经带有流动相的色谱柱时，亲和吸附剂上的配体选择性地吸附能与之结合的物质，而其他蛋白质和杂质不被吸附，流出色谱柱。使用合适的缓冲液来分离它们。
亲和层析一般流程
亲和层析分离的物质通常混合在溶液中，如细胞内容物、培养基或血浆等。待分离的分子通过色谱柱时，被固定相或介质上的基团捕获，而溶液中的其他物质可以顺利通过色谱柱。然后取出固体基质洗脱，目标分子立即洗脱。如果分离的目的是去除溶液中的一些分子，那么只要分子能与介质结合，就不需要洗脱。在再生过程中，调整流动相以洗脱杂质。
亲和层析特殊应用
亲和层析用途广泛。可用于从细胞提取物中分离和纯化核酸和蛋白质，也可用于从血浆中分离抗体。亲和层析常用于分离的蛋白质。通过基因修饰，给蛋白质添加一些人工特性，使蛋白质选择性地与配体结合，从而达到分离的目的。亲和层析的另一大用途是从血浆中分离抗体。
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